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| 土壤碳氮磷转化关键水解酶动力学特征测定方法优化 |
包金美1, 2, 陈法霖2, 张静1, 杨龙超1, 王立志1, 刘波1, 张全艳1, 王芸1,*
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1.山东临沂森林生态系统定位观测研究站, 临沂大学资源环境学院, 临沂 276000
2.洞庭湖区农村生态系统健康湖南省重点实验室, 湖南农业大学环境与生态学院, 长沙 410000
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摘要 土壤碳氮磷转化关键酶参与多糖、纤维素、几丁质、蛋白质和磷酸脂类等物质的转化, 是表征土壤质量的重要指标。相较于酶活性, 酶动力学特征能更加充分地体现不同底物浓度下酶促反应过程。但目前针对不同土壤理化性质, 优化土壤碳氮磷转化关键酶动力学特征测定方法的研究较少, 并存在多种数据分析方法。针对不同理化性质的棕壤, 采用微孔板荧光法, 优化测定条件(底物浓度范围、培养时间、缓冲液、缓冲液pH值和是否加入NaOH溶液)和微孔板板布局以及整合不同研究目的数据分析方法。结果显示: (1)在0.96—7.67 mg·g–1的土壤全碳含量范围内, 优化后的测定条件为土壤α-D-葡糖苷酶、β-D-葡糖苷酶和酸性磷酸酶底物浓度范围为0—200 μmol·L–1, 培养时间分别为4、3和2.5 h; 纤维二糖酶和L-亮氨酸氨基肽酶底物浓度范围为0—400 μmol·L–1, 培养时间分别为4和2 h; N-乙酰-β-D-氨基葡糖苷酶底物浓度范围为0—800 μmol·L–1, 培养时间为4 h。(2)α-D-葡糖苷酶、纤维二糖酶、N-乙酰-β-D-氨基葡糖苷酶动力学特征测定需加入NaOH终止液, 而酸性磷酸酶和L-亮氨酸氨基肽酶可不添加NaOH终止液。(3)土壤酶动力学特征的常见统计分析主要为酶活性统计分析、酶的生态化学计量特征、单个土壤酶动力学参数及影响因子分析、土壤酶动力学复合特征与影响因子之间的关系分析。综上, 土壤碳氮磷转化关键酶动力学特征测定条件应据理化性质优化, 统计方法据研究目的而定。
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| 引用本文: |
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包金美1, 2, 陈法霖2, 张静1, 杨龙超1, 王立志1, 刘波1, 张全艳1, 王芸1,*. 土壤碳氮磷转化关键水解酶动力学特征测定方法优化[J]. 生态科学, 2025, 44(5): 97-.
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| 链接本文: |
| http://www.ecolsci.com/CN/Y2025/V44/I5/97 |
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